从舞鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法步骤
发布人:山东康曼生物科技有限公司 时间:2018-01-22 06:44:56 点击次数:47
从舞鱼鱼骨中提取硫酸软骨素的方法,具体步骤如下: 1) 预处理、脱脂:除去软骨上残留的肌肉、脂肪和其它结缔组织,切碎,加入5倍体积的 丙酮浸泡两次,每次1 h;回收丙酮后,再加入5倍体积的乙醚浸泡1 h后,回收乙醚,自然晾干 舞鱼软骨; 2) 提取:在舞鱼的干燥软骨中加入浓度为3 %NaOH溶液,料液比1:6 (g/ml),在35°C下提 取2h; 3) 取上清,加入3 % (g/ml)的NaCl,90 °C静置20min,过滤; 4) 酶解:用10 %的NaOH调上清液pH至8.9,加入液体体积0.05 % -0.06 %的胰酶,在50-55°C下酶解,在酶解过程中,随时调pH至8.9;酶解完成后,将温度升至85°C,恒温水浴 30min; 5) 吸附:调水解液pH至6.8,加入体积1 %的滑石粉,搅拌吸附lh,再用盐酸调pH至6.4, 4600rpm离心20min,取上清; 6) 沉淀、干燥:调pH至6.0,加入无水乙醇使乙醇体积分数达60%,搅拌,使细粒聚集成 大颗粒沉淀,静置12h以上;收集沉淀,干燥。